Boxbio@ Frequently Asked Questions
01
Q:为什么∆A 会接近于零?

A:①排除试验异常情况且复测后∆A 仍趋于零,表明反应不能发生:如果是测定酶活性,表明样品可能没有酶活性; 如果是测定某种物质,则表明该样品可能不含有此种物质;

   ②体系中还发生了其它干扰反应,该反应的底物或者 产物在该波长下也有光吸收,并且变化方向相反,几乎抵消了正常酶反应,可以通过设置新的对照排除;

   ③样品 保存不当造成预期指标发生改变,需仔细检查样品处理、采集和保存以及提取状况;

02
Q:为什么∆A 会出现负值?

A:①可逆反应造成:可以通过适当缩短反应时间来防止逆反应的发生;

   ②体系中发生其它干扰反应:该反应的底物 或者产物在该波长下也有光吸收,并且变化方向相反,超过了正常反应,可以通过设置新的对照排除。

   ③反应体系 中存在不溶物或者气泡:颗粒沉淀或者气泡破裂后会导致吸光度显著下降,出现负值,颗粒通常来源于样品粗提 液,可以提供再次离心,确保得到澄清的上清液;气泡可能在反应体系中产生,可以通过降低反应速度(如减少样 在反应体系中产生,可以通过降低反应速度(如减少样品质量提取液体积比)来防止气泡产生。

03
Q:不同样品测定值差异不显著

A:①首先需确认反应是否进行:检查标准组吸光值是否正常、试剂配制是否正常、提取过程是否正常、试剂添加顺序 是否正确等;

   ②样本中待测物含量或酶活较低:适当增加样本量或将样本浓缩后再进行测定;

       特别注意:测定酶活 时若需要使用灭活酶液,需检查是否灭活充分,可适当延长粗酶液灭活时间或更改粗酶液灭活方式。

04
Q:同一样品的平行测定结果差异较大

A:①存在干扰物质:可能样本或操作过程中引入了会对反应体系造成误差的干扰物质,如色素、杂质和不溶物等非 检测成分;

   ②系统误差较大:主要与仪器稳定性和操作精确性相关,建议再对同一样品进行 3 次重复测定,若差异 仍然较大,表明系统误差大,需检查仪器状态是否正常和实验操作是否规范。

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